EZ Cell Transfection Reagent，EZ Trans細胞轉染試劑（低毒）/低毒細胞轉染試劑

轉染試劑(ji)產品描述

EZ Trans細胞轉染試(shi)劑(ji)（低毒），作為新一代的轉(zhuan)染(ran)試劑，其轉(zhuan)染(ran)原(yuan)理是帶正電的陽離子聚合(he)物與(yu)核酸中帶(dai)負(fu)電(dian)的磷酸(suan)基團形(xing)成(cheng)帶(dai)正電(dian)的復合物后與細胞表面帶(dai)負(fu)電(dian)的蛋白(bai)多(duo)糖(tang)相互(hu)作(zuo)用(yong)，并(bing)通過(guo)胞吞作(zuo)用(yong)進入細胞。

本產品經過李記生物的優化處理，具有轉染效率高，細胞毒性低，操作簡單，重復性好，適用范圍廣等特點。

以下為低毒轉(zhuan)染試劑說明書，其他(ta)產品詳情請問銷售人員。

細胞(bao)轉染試(shi)劑與慢病毒訂購(gou)信息(xi)

轉染試劑運(yun)輸與保(bao)存

藍冰運輸。4℃保(bao)存，有(you)效期(qi)12個月。【注】：不可冷凍！

轉染試(shi)劑使用方法（以 24 孔板(ban)為例，其(qi)他培養皿中轉(zhuan)染請參考表1）

1. 接種(zhong)細胞

對(dui)于貼(tie)壁細胞，轉(zhuan)染前18-24 h進行鋪(pu)板（不含抗生素），使其在轉染時的密(mi)度大(da)約在80%左右。對于懸浮細胞(bao)，轉(zhuan)染當(dang)天，配(pei)制EZ Trans-DNA復合物之(zhi)前進行鋪板，每500 µL生(sheng)長培養基中加入4~8×10⁵cells。  

【注】：培養液中的血(xue)清不(bu)影(ying)響轉染(ran)效率。轉染(ran)試劑(ji)使(shi)用量受細胞類型(xing)及其他實驗條件影(ying)響，建議初次使(shi)用時設置梯度進行優化最佳使(shi)用量。

2. 準備EZ Trans-DNA復合物(wu)

（1）對于每孔細胞，將(jiang)1 μg質粒(li)DNA稀(xi)釋到40 μL無血清的(de)高糖(tang)DMEM培養基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基），混勻(yun)。

（2）對(dui)于每孔(kong)細胞，將3 μL EZ Trans轉染試劑(ji)稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基），輕輕混勻(yun)。

【注】：無血清的高糖(tang)DMEM培養基(ji)是稀釋(shi)液，不能使用含血清(qing)的培養基(ji)進行DNA和(he)EZ Trans轉染試劑(ji)的稀釋(shi)。因為EZ Trans-DNA轉(zhuan)染(ran)復合(he)物(wu)的形成(cheng)過程(cheng)不能(neng)含有血清。

（3）將稀(xi)釋好的EZ Trans轉染試(shi)劑(ji)盡快全部加(jia)入到(dao)已稀釋好的質粒DNA中，輕輕混勻(yun)。

【注】：此(ci)混合的(de)順(shun)序不能反(fan)向進(jin)行。

（4）室溫(wen)放置10-15 min，以形成EZ Trans-DNA復合(he)物。

3. 轉染細胞(bao)

（1）將上(shang)述80 μL EZ Trans-DNA轉染復(fu)合物(wu)(wu)均勻滴入到含細胞的培(pei)養皿(min)中。輕(qing)輕(qing)晃動培(pei)養皿(min)或輕(qing)微振蕩(dang)，讓EZ Trans-DNA復(fu)合物(wu)(wu)分散均勻。

（2）在37℃，5% CO₂培養(yang)箱培養(yang)6-18 h，去除(chu)含EZ Trans-DNA復合(he)物(wu)的(de)培養液，更換(huan)新的(de)培養液，繼續培養至(zhi)對轉(zhuan)入基因(yin)表達分(fen)析。

【注(zhu)】：篩選穩定轉(zhuan)染細(xi)胞株，轉(zhuan)染細(xi)胞24 h后，將細(xi)胞(bao)傳代(dai)至新鮮的生長培養(yang)基中（將細(xi)胞(bao)稀釋10倍(bei)以上），在(zai)37℃，5% CO2培養(yang)箱中孵(fu)育(yu)24 h，加入篩(shai)選(xuan)(xuan)培養(yang)基。在(zai)有轉染抗性基因相匹配的(de)藥(yao)物篩(shai)選(xuan)(xuan)條(tiao)件下，約(yue) 1～2周(zhou)可(ke)篩(shai)選(xuan)(xuan)到(dao)耐(nai)藥(yao)性克隆，在(zai)這期間需經常更(geng)換含篩(shai)選(xuan)(xuan)藥(yao)物的(de)生長培養(yang)基。

公司(si)簡介

　　上海李記生(sheng)物(wu)科技有限公司(si)是(shi)一(yi)家集研發(fa)、生(sheng)產(chan)(chan)、銷售為一(yi)體的(de)高科技生(sheng)物(wu)技術(shu)企(qi)業，產(chan)(chan)品涵蓋細(xi)胞(bao)生(sheng)物(wu)學(xue)、分子生(sheng)物(wu)學(xue)、動物(wu)學(xue)等，我們的(de)產(chan)(chan)品都基(ji)于設計，在保證品質的前提下，具有易用、經濟、高效的特點。
　　我(wo)(wo)(wo)們(men)立志做百年企業，我(wo)(wo)(wo)們(men)愿與您(nin)一同成長，很(hen)多我(wo)(wo)(wo)們(men)的(de)產品創(chuang)意(yi)來自于像您(nin)一樣(yang)的(de)客戶老師，我(wo)(wo)(wo)們(men)提供的(de)不僅是(shi)產品，還有一個創(chuang)新平臺，我(wo)(wo)(wo)們(men)期(qi)待(dai)您(nin)的(de)參與，攜手(shou)發展，共創(chuang)輝(hui)煌。實(shi)現中國夢，是(shi)全民族的(de)事，生命科學(xue)領域中的(de)你我(wo)(wo)(wo)同樣(yang)肩負使(shi)命，讓我(wo)(wo)(wo)們(men)用不同的(de)方式貢獻自己的(de)力量！

　　李記優勢產品(pin)：蛋白Marker、EZ Trans細胞轉染液、CCK-8細胞活性增殖檢(jian)測試劑、支原(yuan)體快速檢(jian)測試劑盒、核酸染料（GelRed）、EZ Protein any KD PAGE蛋(dan)白電泳試劑盒、熒光染料（Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5）、胎牛血清、細胞凋亡檢測試劑盒、低毒細胞轉染試劑等。

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