涉及產品

1. EZ Trans Plus細胞轉染試劑（Ⅱ）　貨號：AC04L011

2. EZ Trans細胞轉染試劑（高效）　　貨(huo)號：AC04L091/AC04L092

3. EZ Trans細胞轉染試劑（低毒）　　貨號：AC04L098/AC04L099

其他轉染產(chan)品

1. EZ Trans Pro細胞轉染試劑（GMP）　貨號(hao)：AC04L032/AC04L033/AC04L034

2. EZ Trans RNA轉染試劑　　　　　　　貨(huo)號：AC04L051

李記生(sheng)物細胞轉染試劑常(chang)見問題（一）

Q1：李記有(you)3款轉(zhuan)染試劑，這3款有(you)什么區別？和Li**對比效果如何？

A1：我司自行測(ce)試(shi)與收集客(ke)戶反(fan)饋數據(ju)，得到類似(si)結論：

　　效率方(fang)面：EZ Trans Plus＞Li**2000≈EZ Trans(高(gao)效)＞Li** 3000＞EZ Trans(低毒(du))

　　毒性方面：EZ Trans(低毒)≈Li**3000＜EZ Trans Plus＜EZ Trans(高效)≈Li**2000

Q2：我們傳的細胞(bao)有抗(kang)生素，抗(kang)生素是(shi)絕對會(hui)影響(xiang)轉染效率嗎？

A2：能(neng)不加(jia)盡量不加(jia)，理論上抗生(sheng)素進(jin)不到細(xi)胞內(nei)，但是在轉(zhuan)染試劑的作用下(xia)，細(xi)胞的通(tong)透(tou)性增加(jia)，抗生(sheng)素可能(neng)進(jin)到細(xi)胞內(nei)，對實驗結果完成(cheng)影響。

Q3：protocol提到，要用Opti-MEM稀(xi)(xi)(xi)釋(shi)(shi)質(zhi)粒(li)和轉染(ran)試(shi)(shi)劑。不(bu)能用1640稀(xi)(xi)(xi)釋(shi)(shi)么(me)(me)？另(ling)外(wai)質(zhi)粒(li)和轉染(ran)試(shi)(shi)劑為什(shen)么(me)(me)要先稀(xi)(xi)(xi)釋(shi)(shi)然后(hou)(hou)再混(hun)合？不(bu)能把轉染(ran)試(shi)(shi)劑直接加到質(zhi)粒(li)溶(rong)液中混(hun)合，然后(hou)(hou)再加培養基稀(xi)(xi)(xi)釋(shi)(shi)么(me)(me)？

A3：EZ Trans細胞轉染(ran)液屬于陽離子(zi)類型的轉染(ran)試(shi)劑，它與(yu)DNA形(xing)成(cheng)復合物(wu)需要(yao)一定的條件，在合適的濃度下，有利于陽離子(zi)包(bao)裹(guo)DNA形(xing)成(cheng)良好形(xing)態的復合物(wu)進入細胞。

　　如果直(zhi)接(jie)把兩者(zhe)直(zhi)接(jie)混合，兩者(zhe)容易(yi)(yi)很快形成聚(ju)合物，聚(ju)集相(xiang)態多樣，有可能使DNA暴露在表面，不容易(yi)(yi)進(jin)入細胞，進(jin)而降低轉染效(xiao)率。所以EZ Trans和DNA的混合順(shun)序也很重要(yao)。

　　培養細胞(bao)大(da)多會用到胎牛血清，血清成(cheng)分(fen)復雜(za)，沒有(you)人能說清成(cheng)分(fen)及含量。細胞(bao)轉(zhuan)染液成(cheng)分(fen)比較明確，但是不能確定是會不會與胎牛血清的(de)不明成(cheng)分(fen)結(jie)合(he)，事實上(shang)這種現象在大(da)多數轉(zhuan)染試劑中(zhong)都會造成(cheng)不良影(ying)響，所以在形成(cheng)EZ Trans-DNA復合(he)物過程中(zhong)要避免血清的(de)影(ying)響。

Q4：protocol提到，“24-48小時內檢測轉染(ran)效(xiao)率"指的(de)是(shi)去除含(han)復(fu)(fu)合物的(de)培(pei)養(yang)液(ye)換成含(han)血清的(de)培(pei)養(yang)基之后的(de)24-48h，還是(shi)指加入(ru)復(fu)(fu)合物后轉染(ran)24-48h？

A4：所(suo)有時間都是從EZ Trans-DNA復合物(wu)與細胞接觸開始算。

Q5：我就是問的體內(nei)直接(jie)轉染小鼠。你們現有的protocol是體外(wai)實驗的方法(fa)?

A5：體(ti)內直接(jie)轉(zhuan)染目前(qian)最(zui)多的是腺(xian)病毒(du)，慢病毒(du)，腺(xian)相關(guan)病毒(du)。轉(zhuan)染試劑(ji)直接(jie)在體(ti)內用的報(bao)道我們(men)目前(qian)沒(mei)有聽過。現(xian)有的做法是細(xi)胞在體(ti)外培養，轉(zhuan)染篩選后再(zai)打入(ru)體(ti)內。

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