EZ Trans細胞轉染試劑(ji)與EZ 慢病毒系列/原代細胞轉染試劑

轉染試劑產(chan)品描述

EZ Trans細胞轉(zhuan)染(ran)試劑作(zuo)為新一代的轉(zhuan)染(ran)試劑，其轉(zhuan)染(ran)原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸(suan)中帶負(fu)電的(de)磷酸基團(tuan)形成帶正電的(de)復合物后與細(xi)胞(bao)(bao)表面帶負(fu)電的(de)蛋白多糖相互作(zuo)(zuo)用，并通過胞(bao)(bao)吞作(zuo)(zuo)用進入細(xi)胞(bao)(bao)。

本(ben)產品(pin)經過李記生(sheng)物的優化處理(li)，具有轉染效率高，細胞毒性低，操作簡單，重復性好，適(shi)用范圍廣等特點。

以(yi)下為高效(xiao)轉染試劑說明書，其他(ta)產品(pin)詳(xiang)情請問銷(xiao)售(shou)人員(yuan)。

細胞轉染試劑與慢病毒(du)訂購信(xin)息(xi)

轉染試劑(ji)運輸與保(bao)存

藍冰運(yun)輸。4℃保(bao)存，有效期12個(ge)月。【注】：不可冷凍(dong)！

高效轉染(ran)試劑使用方法（以 24 孔(kong)板為(wei)例，其(qi)他培養皿中轉染請(qing)參考表(biao)1）

1. 接種細胞

對于(yu)貼壁細(xi)胞，轉染前(qian)18-24 h進行鋪板（不含抗生素(su)），使其在(zai)轉染時的密度大約(yue)在(zai)80%左右。對(dui)于懸浮細胞，轉染當天，配(pei)制EZ Trans-DNA復合物之(zhi)前進行鋪板，每(mei)500 µL生(sheng)長培養基(ji)中(zhong)加入(ru)4~8×10⁵cells。  

【注】：培(pei)養液中的血清不影響(xiang)轉(zhuan)染效率(lv)。轉(zhuan)染試(shi)劑使(shi)(shi)用量(liang)受細胞類型及其他實驗條(tiao)件影響(xiang)，建議初次使(shi)(shi)用時設置梯(ti)度進(jin)行優化最佳使(shi)(shi)用量(liang)。

2. 準備EZ Trans-DNA復合物

（1）對于每孔(kong)細胞，將1 μg質(zhi)粒(li)DNA稀(xi)釋到40 μL無(wu)血清(qing)的(de)高糖DMEM培養基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基），混勻。

（2）對于每孔細胞，將3 μL EZ Trans轉染試劑稀(xi)釋到(dao)40 μL無血清的高糖(tang)DMEM培(pei)養(yang)(yang)基（或者(zhe)OPTI-MEM Ⅰ 培(pei)養(yang)(yang)基），輕(qing)輕(qing)混(hun)勻。

【注】：無(wu)血清的高(gao)糖(tang)DMEM培(pei)養(yang)基(ji)是稀釋液，不(bu)能使用(yong)含血清的培(pei)養(yang)基(ji)進行DNA和(he)EZ Trans轉染(ran)試劑的稀釋。因(yin)為(wei)EZ Trans-DNA轉(zhuan)染復合物的形成過程不能含有血(xue)清。

（3）將稀釋好的EZ Trans轉染(ran)試劑(ji)全部加入(ru)到已稀釋好(hao)的(de)質粒DNA中，輕(qing)輕(qing)混勻。

【注】：此混合的(de)順序不能反(fan)向(xiang)進(jin)行。

（4）室溫放置(zhi)10-15 min，以形成EZ Trans-DNA復合物。

3. 轉染細(xi)胞

（1）將(jiang)上述(shu)80 μL EZ Trans-DNA轉染復合(he)物均勻滴入到含細胞的培養皿中(zhong)。輕輕晃動培養皿或輕微(wei)振蕩(dang)，讓EZ Trans-DNA復合(he)物分散均勻。

（2）在37℃，5% CO₂培養箱培養6-18 h，去(qu)除含EZ Trans-DNA復合(he)物的培養液，更(geng)換新的培養液，繼續培養至對轉入(ru)基因表達(da)分(fen)析。

【注】：篩選穩定轉染(ran)細胞(bao)株(zhu)，轉染(ran)細胞(bao)24 h后，將(jiang)細(xi)胞(bao)傳代至新鮮的生長培(pei)養基中（將(jiang)細(xi)胞(bao)稀釋10倍(bei)以上），在37℃，5% CO2培(pei)養箱中孵育24 h，加入篩(shai)選(xuan)(xuan)培(pei)養基。在有轉染抗性基因(yin)相匹配(pei)的藥物篩(shai)選(xuan)(xuan)條件下(xia)，約 1～2周可篩(shai)選(xuan)(xuan)到耐(nai)藥性克(ke)隆，在這期(qi)間需經常更換含(han)篩(shai)選(xuan)(xuan)藥物的生長培(pei)養基。

注意事項

1. 本(ben)產(chan)品僅限(xian)于科學實(shi)驗研(yan)究使用，不(bu)得(de)用于臨(lin)床診斷、治療等領域(yu)。

公司簡介

　　上海李記生(sheng)物(wu)科(ke)技(ji)有限(xian)公(gong)司(si)是一家集研發、生(sheng)產(chan)、銷售為一體的高科(ke)技(ji)生(sheng)物(wu)技(ji)術企(qi)業，產(chan)品涵蓋細胞生(sheng)物(wu)學(xue)、分子生(sheng)物(wu)學(xue)、動(dong)物(wu)學(xue)等，我們(men)的產(chan)品都基于設計，在(zai)保證品質的前提(ti)下，具有易用(yong)、經(jing)濟、高效(xiao)的特點。
　　我(wo)們(men)立志做(zuo)百年企業，我(wo)們(men)愿(yuan)與您一(yi)同成長，很多(duo)我(wo)們(men)的(de)(de)(de)(de)產品創意來自(zi)于像您一(yi)樣(yang)的(de)(de)(de)(de)客戶老師，我(wo)們(men)提供的(de)(de)(de)(de)不(bu)僅(jin)是產品，還有一(yi)個創新平臺，我(wo)們(men)期待您的(de)(de)(de)(de)參與，攜手發(fa)展(zhan)，共創輝煌。實現中國夢，是全民族的(de)(de)(de)(de)事，生命(ming)科學領域中的(de)(de)(de)(de)你(ni)我(wo)同樣(yang)肩負使命(ming)，讓我(wo)們(men)用不(bu)同的(de)(de)(de)(de)方式貢獻自(zi)己的(de)(de)(de)(de)力量(liang)！

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