Anti-GST免疫磁珠將(jiang)高質量的(de)鼠源單克隆 Anti-GST 抗體共價偶聯在超(chao)順磁性(xing)納(na)米微(wei)球表面,可(ke)特異性(xing)地與(yu)動植物(wu)或微(wei)生物(wu)裂解液、血(xue)清、腹水等(deng)中(zhong)含有(you) HIS 標簽的(de)蛋白結合，從而用于帶有(you) His 標簽的(de)融合蛋白或其蛋白復(fu)合物(wu)的(de)免(mian)疫(yi)沉淀(dian)(Immunoprecipitation, IP)、免(mian)疫(yi)共沉淀(dian)(Co-IP)或純化。

Anti-GST Magnetic Beads (Anti-GST 磁珠)，可以特異(yi)性地結(jie)合 GST 標簽融合蛋白，并可以借(jie)助磁力(li)架(jia)等磁分離設(she)備非常便捷(jie)地應用(yong)于帶有(you) GST 標簽的(de)融合蛋白或其蛋白復合物的(de)免(mian)疫沉淀或純化等實驗。

產品優勢

1.具有高效的蛋白結合能力。

2.超低非(fei)特異性吸(xi)附的性能。

3.配合磁(ci)力架操作省時、簡便、溫(wen)和。

4.產品穩定性高。

訂購信息

常溫運輸。4℃保存，有效期 24 個月。

技術參數

貼壁細胞樣品

1.移去培(pei)養基，用(yong) PBS 洗細胞兩次。

2.收集(ji)細(xi)胞至 1.5 mL EP 管(guan)內，按比例加入 IP Lysis/Wash Buffer，同時(shi)加入 PMSF 等相應的(de)抑(yi)制劑，混勻后置于(yu)冰上靜置 5-20 min（期(qi)間混勻幾次）。

3.4 ℃, 12000-16000 g,10 min 離心(xin)收集上清(qing)液，置于冰上以備(bei)后續(xu)實驗（或置于-80 ℃長期保存）。

表 1.培(pei)養皿(min) IP Lysis/Wash Buffer 推薦使(shi)用體積

懸浮細胞樣品

1.4℃、500-1000 g、10 min，收集細胞，棄(qi)上清。

2.用 PBS 洗細(xi)胞(bao)一次(ci)，即用 PBS 將細(xi)胞(bao)團重(zhong)懸，4℃、500-1000 g、10 min，收集細(xi)胞(bao)，棄(qi)上清(qing)。

3.用(yong)預冷的 IP Lysis/Wash Buffer 重懸(xuan)細胞。每 50mg 細胞使用(yong) 500μL IP Lysis/Wash Buffer。同(tong)時加入 PMSF 等相應的抑制劑，混勻后(hou)置于冰上靜置 5-20 min（期間混勻幾次）。

4.4 ℃, 12000 -16000 g,10 min 離(li)心收集上清(qing)液，置(zhi)于冰上以備后續實驗（或(huo)置(zhi)于-80 ℃長期(qi)保存(cun)）。

血清樣品

一般建議建議用 IP Lysis/Wash Buffer 稀(xi)釋血清樣品至目標蛋白終(zhong)濃度(du)為 50~150 µg/mL，置(zhi)(zhi)于冰上備用（或置(zhi)(zhi)于-20 ℃長期保存）。

免疫沉淀

【注】：為保(bao)證磁珠均勻分布，使用前通過(guo)反復顛倒或輕微渦旋混勻瓶中磁珠。

1.將 25µL(0.25 mg)的 Anti-GST Magnetic Beads 加入(ru) 1.5 mL 離(li)心管中。

2.向磁珠中(zhong)加入(ru) 500 µL 預冷 PBS，輕(qing)柔(rou)混勻。

3.將(jiang)離(li)心(xin)(xin)管放入磁(ci)力架中收集磁(ci)珠到離(li)心(xin)(xin)管的(de)一邊。去除上清(qing)。

4.向離心管(guan)中加入 200-500 µL IP Lysis/Wash Buffer。顛(dian)倒離心管(guan)數次或輕微渦(wo)旋混勻 1min。用(yong)磁(ci)力架收(shou)集磁(ci)珠。去除上清。

5.將制備好含(han)有(you) GST 標記蛋白(bai)加入裝有(you)磁珠的(de)離(li)心管中，保持混勻(yun)室溫下孵育 1-2 h。

6.用磁力(li)架收集(ji)磁珠(zhu)，除去(qu)未結合的樣(yang)品，保存(cun)以(yi)備分析(xi)。

7.向(xiang)離心管(guan)中加入 500 µL IP Lysis/Wash Buffer，輕柔混勻。收集磁(ci)珠，棄上清。再(zai)重(zhong)復洗兩次(ci)。

8.變性洗脫：向(xiang)離心管(guan)中加入 80-100 µL SDS-PAGE Sample Loading Buffer（1×），將樣品置于 100℃水浴或者(zhe)金屬浴中加熱 10 min。通過磁力架分離磁珠(zhu)，保(bao)留含(han)有目(mu)的抗原的上清。

【注(zhu)】：如需保(bao)持蛋(dan)白活性，也可采用(yong)以下洗脫方式(shi)。

低 pH 洗(xi)脫(tuo)：向離心管中(zhong)(zhong)加(jia)入(ru) 100 µL Elution Buffer。保(bao)持(chi)混勻在室溫下孵育離心管 5-10 min。通過磁(ci)力分(fen)離磁(ci)珠(zhu)，保(bao)留(liu)含有目的(de)抗原的(de)上清(qing)。每 100 µL 洗(xi)出液中(zhong)(zhong)加(jia)入(ru) 20 µL Neutralization Buffer 來中(zhong)(zhong)和低 pH。

注意事項

1.本產品僅限(xian)于科學(xue)實驗(yan)研究使用(yong)，不得用(yong)于臨床(chuang)診斷、治療等領(ling)域(yu)。

2.請(qing)勿高速離心、干燥或(huo)冷(leng)凍磁珠(zhu)，這(zhe)些操作會導致(zhi)磁珠(zhu)聚(ju)集而降低結合能力(li)。

3.IP 實(shi)驗(yan)(yan)中不同類型的(de)(de)抗(kang)體與抗(kang)原結合(he)的(de)(de)親和性是有區別的(de)(de)，抗(kang)體與抗(kang)原結合(he)還會受(shou)到 IP Lysis/WashBuffer 的(de)(de)影(ying)響，因此(ci)，如(ru)使用(yong)本實(shi)驗(yan)(yan)步驟不能獲得(de)最佳的(de)(de)實(shi)驗(yan)(yan)結果，可自(zi)行(xing)優化(hua)操作細節或(huo)者篩選(xuan)及配(pei)制緩沖液進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)(yan)，推(tui)薦使用(yong)李記生物(wu)的(de)(de)相(xiang)關產品，參(can)照(zhao)相(xiang)關產品推(tui)薦。

4.微球使用前應充分振蕩均勻。微球應保存在儲存溶(rong)液中，防止干(gan)燥。

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