鏈霉親和素磁珠將(jiang)高質(zhi)量的(de)鏈霉親和素(su)(su)共價偶聯在超順磁性納米微球(qiu)表面,可特(te)異性地(di)與生(sheng)物素(su)(su)化分子的(de)蛋白或核酸結合，從(cong)而方便快速完(wan)成免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、Pull down 或生(sheng)物素(su)(su)標(biao)記蛋白或核酸的(de)純化。并可以借助磁力架等磁分離(li)設備非常便捷地(di)應用于相關實驗。

產品優勢

1.具有高效的蛋白結合能力。

2.超(chao)低(di)非特異(yi)性(xing)吸(xi)附的性(xing)能(neng)。

3.配合(he)磁力架操作省時(shi)、簡便、溫和。

4.產品穩定性高。

訂購信息

常溫運輸。4℃保存，有效期 24 個月。

技術參數

免疫沉淀

【注(zhu)】：為保證(zheng)磁(ci)珠均勻(yun)分布(bu)，使用(yong)前(qian)通過反復顛倒或(huo)輕(qing)微(wei)渦旋混(hun)勻(yun)瓶(ping)中磁(ci)珠。

1.將(jiang) 25µL(0.25 mg)的(de)鏈霉親和(he)素磁 珠(zhu)加(jia)入 1.5 mL 離(li)心(xin)管(guan)中。

2.向(xiang)磁珠中加入(ru) 500 µL 預冷(leng) PBS，輕柔混(hun)勻。

3.將離(li)心管放入(ru)磁力(li)架中收集磁珠到(dao)離(li)心管的(de)一邊。去除上清。

4.向(xiang)離(li)心(xin)管中(zhong)加入 200-500 µL IP Lysis/Wash Buffer。顛倒離(li)心(xin)管數次(ci)或(huo)輕微(wei)渦(wo)旋混勻(yun) 1min。用(yong)磁力(li)架(jia)收集磁珠。去除上(shang)清，待用(yong)。

5.將制(zhi)備好的蛋白樣品與生物素標記抗體混勻，室(shi)溫下孵(fu)育 1-2 h 或 4°C 過夜。

6.將上述混合物加入預洗好的磁(ci)珠中混勻，室溫下孵育 1-2 h 或 4°C 過夜。

7.用(yong)磁力架收集磁珠，除(chu)去未結合的樣品，保存以備(bei)分析。

8.向離心管中加(jia)入 500 µL IP Lysis/Wash Buffer，輕柔混勻(yun)。收(shou)集磁珠，棄(qi)上清(qing)。再(zai)重復洗(xi)兩次。

9.變性洗脫：向離(li)(li)心管中(zhong)加(jia)入 80-100 µL SDS-PAGE Sample Loading Buffer（1×），將樣(yang)品置于 100℃水浴或者金屬浴中(zhong)加(jia)熱 10 min。通過磁力架分離(li)(li)磁珠，保留含有目的抗原的上清(qing)。

【注】：如(ru)需保持(chi)蛋白活性，也(ye)可采用以下洗(xi)脫方式。

低(di) pH 洗脫：向離心(xin)管中(zhong)(zhong)加(jia)入 100 µL Elution Buffer。保(bao)持(chi)混勻在(zai)室溫下孵育離心(xin)管 5-10 min。通過磁(ci)(ci)力分(fen)離磁(ci)(ci)珠，保(bao)留含(han)有目的抗原的上清。每 100 µL 洗出液中(zhong)(zhong)加(jia)入 20 µL Neutralization Buffer 來中(zhong)(zhong)和低(di) pH。

注意事項

1.本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

2.請(qing)勿高速離心、干燥或冷凍磁珠，這些操作會導致(zhi)磁珠聚集而降(jiang)低結合能力(li)。

3.IP 實(shi)(shi)驗(yan)(yan)中不同(tong)類型的(de)(de)(de)抗體與抗原(yuan)結合(he)的(de)(de)(de)親和性是有區別的(de)(de)(de)，抗體與抗原(yuan)結合(he)還會受(shou)到 IP Lysis/WashBuffer 的(de)(de)(de)影響，因(yin)此(ci)，如使用本(ben)實(shi)(shi)驗(yan)(yan)步驟不能獲得(de)最(zui)佳的(de)(de)(de)實(shi)(shi)驗(yan)(yan)結果，可自行(xing)(xing)優化(hua)操作細節或者篩選(xuan)及配制緩沖液進(jin)行(xing)(xing)實(shi)(shi)驗(yan)(yan)，推(tui)薦使用李記(ji)生物的(de)(de)(de)相關(guan)產品，參照相關(guan)產品推(tui)薦。

4.微球(qiu)使用前應充(chong)分振蕩均勻。微球(qiu)應保存(cun)在儲存(cun)溶液(ye)中，防止(zhi)干(gan)燥(zao)。

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