D-Luciferin, sodium salt  D-熒光(guang)*鈉鹽（超(chao)純）

產品描述
      D-熒光*鈉鹽（超純）介紹： D-熒光素（D-Luciferin）是很流行和多功能的生物發光底物。螢火蟲熒光素酶/熒光素生物發光系統存在于螢火蟲（Photinus pyralis）和其他幾種甲蟲中。熒光素酶通過二氧雜環丁酮中間體氧化ATP活化的熒光素。螢火蟲熒光素酶通過熒光素的ATP依賴性氧化產生光。來自該反應的560nm化學發光在數秒內達到峰值，當熒光素和ATP過量存在時，光輸出與熒光素酶活性成比例。螢火蟲熒光素酶長期以來與抗體結合，并在熒光素作為檢測底物的免疫測定中用作標記物。與HRP和堿性磷酸酶相比，熒光素酶對化學修飾的耐受性較差。該酶的一個特別優點是除了其高靈敏度之外，在哺乳動物組織中存在低內源熒光素酶活性。熒光素酶的另一個重要用途是衛生監測領域。熒光素酶/熒光素系統可用于檢測污染，因為存在于所有生物體中的ATP需要產生發光。這種ATP生物發光的主要應用是通過測試食品加工廠中的表面來確定質量，以確定是否存在設備或產品的污染。              

D-熒(ying)光素也常(chang)用(yong)于(yu)體(ti)外(wai)研(yan)究，包括熒(ying)光素酶和(he)(he)ATP水平分析；報告基因(yin)分析；高通量(liang)測(ce)序(xu)和(he)(he)各種(zhong)(zhong)污染檢測(ce)。目前市場上有三種(zhong)(zhong)產(chan)品(pin)形式，D-熒(ying)光素（游(you)離(li)酸），D-熒(ying)光*鈉鹽(yan)(yan)，以及(ji)D-熒(ying)光素鉀(jia)鹽(yan)(yan)。這三種(zhong)(zhong)產(chan)品(pin)主(zhu)要的(de)(de)差(cha)別(bie)在于(yu)溶(rong)(rong)解(jie)特性上。D-熒(ying)光素（游(you)離(li)酸）水溶(rong)(rong)性以及(ji)緩沖體(ti)系(xi)的(de)(de)溶(rong)(rong)解(jie)性都很弱(ruo)，除(chu)非溶(rong)(rong)于(yu)弱(ruo)堿如NaOH和(he)(he)KOH溶(rong)(rong)液。溶(rong)(rong)于(yu)甲(jia)醇(chun)（10 mg/ml）和(he)(he)DMSO（50 mg/ml）。但鈉鹽(yan)(yan)和(he)(he)鉀(jia)鹽(yan)(yan)形式的(de)(de)D-熒(ying)光素能夠非常(chang)容(rong)易且快速的(de)(de)溶(rong)(rong)入(ru)水或者緩沖液中(zhong)，使用(yong)方便(bian)，溶(rong)(rong)劑無毒(du)性，特別(bie)適合(he)體(ti)內實(shi)驗。配成液體(ti)后的(de)(de)這三種(zhong)(zhong)產(chan)品(pin)，在絕大多數的(de)(de)應用(yong)上都沒有實(shi)質(zhi)性的(de)(de)差(cha)別(bie)。

訂購信息

產品性質

運輸與保存方法
冰袋運輸(shu)，-20℃保存，保質期24個月。

使用方法
1.用于(yu)體(ti)外生物發光(guang)圖像測(ce)定的實(shi)施方案(an)

1.在無菌水中制備100mM（100-200X）熒(ying)光素(su)原液。混(hun)合均勻。立即使用，或單獨使用等(deng)分試(shi)樣，并(bing)儲(chu)存在-20°C，避免(mian)凍(dong)融循環，避免(mian)暴(bao)露在光線下。

2.在(zai)預熱的(de)組織培養基中制備0.5-1mM D-熒光素的(de)工作(zuo)溶液。

3.從(cong)培養細胞中分離培養基(ji)。

4.將熒光素(su)工作溶液加(jia)入細(xi)胞中，并在(zai)成像前將細(xi)胞在(zai)37°C孵育5-10分鐘。

2. 用于體內生物發光圖像測定的實施方案

1.在DPBS中制(zhi)備(bei)15mg / mL熒(ying)光素儲備(bei)溶液，不含Mg2+和Ca2+。 混合均(jun)勻。

2.過濾(lv)器(qi)通過0.2μm過濾(lv)器(qi)過濾(lv)滅菌溶液。立即使用(yong)，或單(dan)獨使用(yong)等(deng)分試樣，并(bing)儲存在(zai)(zai)-20°C，避(bi)免凍(dong)融循環，避(bi)免暴(bao)露(lu)在(zai)(zai)光(guang)線下(xia)。

3.在動物體重150mg / kg（或10μL/ g熒光素(su)儲(chu)備溶液(ye)）成像(xiang)*-15分鐘(zhong)腹膜內（i.p.）注射熒光素(su)。

注意：應對每種動物模型進行熒光素的動力學研究，以確定峰值信號時間。
3.熒光素報告分析分子測定的實施方案

1.在無(wu)菌水中(zhong)制備100mM熒光(guang)(guang)素儲備溶液。 立即使用，或單獨使用等分試(shi)樣(yang)，并儲存在-20°C，避免(mian)凍(dong)融(rong)循環，避免(mian)暴露在光(guang)(guang)線下(xia)。

2.制備1mM D-熒光素(su)的(de)工作溶液，其中含有(you)3mM ATP，1mM DTT和(he)15mM MgSO 4的(de)25mM tricine緩(huan)沖液，pH7.8。

3.將5-10μl細胞裂解液移入微孔(kong)板中。使用不含裂解液的裂解試劑(ji)或緩沖(chong)液作(zuo)為空白。

4.根據制造商的(de)說明，使(shi)用(yong)熒光素工作溶液的(de)普利光度計。

5.注入200μl熒光素工作溶液，無延遲，10秒積分(fen)時間。

注意事項
1：D-熒光(guang)素(su)鉀鹽(yan)溶(rong)于無菌水(shui)和緩沖液(ye)，溶(rong)解(jie)(jie)度可(ke)高達25mg/mL。一般使用濃(nong)度為3-15 mg/mL。溶(rong)液(ye)的(de)(de)(de)pH值(zhi)、溶(rong)液(ye)中的(de)(de)(de)氧(yang)氣(qi)和保存時間對其保存過(guo)程中的(de)(de)(de)穩(wen)定性(xing)非常重要(yao)。當溶(rong)液(ye)的(de)(de)(de)pH<6.5（發生水(shui)解(jie)(jie)作用）或>7.5（發生消旋化(hua)作用，D型轉化(hua)為L型）的(de)(de)(de)情(qing)況下，D-熒光(guang)素(su)鉀鹽(yan)相(xiang)對不穩(wen)定。如果溶(rong)液(ye)中存在少量的(de)(de)(de)氧(yang)氣(qi)，將加速(su)D-熒光(guang)素(su)鉀的(de)(de)(de)降解(jie)(jie)速(su)度。儲備(bei)溶(rong)液(ye)可(ke)以在不含ATP的(de)(de)(de)水(shui)中制備(bei)，并在-20°C下避光(guang)儲存。必須用適(shi)當的(de)(de)(de)堿中和游離酸(suan)溶(rong)解(jie)(jie)。

2：D-熒光(guang)素可與任何現有(you)的(de)文(wen)獻或ATP分析系統一起使(shi)用。

3：如果檢測ATP，請戴(dai)上手套并使(shi)用無(wu)ATP容器，盡量減少所有可能的ATP污(wu)染源(yuan)。僅使(shi)用無(wu)菌無(wu)ATP水和試劑(ji)。使(shi)用高壓(ya)滅菌水進行所有試劑(ji)制備。