產品描(miao)述
　　Bradford 法蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)是基于考馬斯(si)亮藍G-250與蛋(dan)白(bai)質結(jie)合(he)后， 產(chan)生藍色(se)化(hua)合(he)物(wu)，反應迅(xun)速(su)而穩定(ding)。反應化(hua)合(he)物(wu)在(zai)465-595nm處有(you)大(da)(da)的(de)光吸收(shou)值(zhi)，化(hua)合(he)物(wu)顏(yan)色(se)的(de)深淺與蛋(dan)白(bai)濃(nong)度的(de)高低成正比關系，因此可通過檢(jian)測595nm的(de)光吸收(shou)值(zhi)的(de)大(da)(da)小來計算蛋(dan)白(bai)的(de)含量(liang)。
訂購信息

產品組(zu)分

保(bao)存方法(fa)
　　冰袋運輸，Bradford試劑A 2-8°C保(bao)(bao)存，蛋白標(biao)準品-20°C保(bao)(bao)存，保(bao)(bao)質期(qi)一年。
使用方法
方案一(yi)、試(shi)管檢(jian)測
1、試劑準備(bei)
（1）取適量5mg/ml蛋白標(biao)準，PBS稀釋至終濃度為(wei)2mg/ml蛋白標(biao)準。配(pei)制后可立即使用，也可以-20°C長期保存。
（2）稀(xi)(xi)釋(shi)BSA標(biao)準品(pin)：用與待(dai)測蛋白樣(yang)品(pin)相一致的稀(xi)(xi)釋(shi)液按(an)下表稀(xi)(xi)釋(shi)BSA標(biao)準品(pin)。
表1：BSA標準品配制表

（3）取干凈的(de)試(shi)管，將30μl稀釋(shi)好的(de)BSA標準品分別加到作好標記的(de)試(shi)管中。
（4）取干凈的試管，分別(bie)加入30μl待測蛋(dan)白樣(yang)品(pin)(原(yuan)液或稀(xi)釋液)，并作好標記(ji)，推(tui)薦每個樣(yang)品(pin)做2-3 個平行反應。
2、樣品孵育及檢測(ce)
（1）向上一步驟配制(zhi)的不同(tong)濃度的標準品(pin)BSA和待測樣(yang)品(pin)試管(guan)中各加入1.5ml Bradford蛋白定(ding)量試劑，充(chong)分(fen)混勻(yun)，室(shi)溫放置10分(fen)鐘(zhong)。
（2）用(yong)分光光度計測定(ding)595nm 處(chu)的(de)吸光值(zhi)。
3、制作標準曲(qu)線和計算樣(yang)品濃度
（1）利用(yong)Excel或其他軟件繪(hui)制標準曲線(xian)，并(bing)計(ji)算(suan)樣品中的蛋白濃度。
（2）如果(guo)所(suo)得到的蛋白濃度不(bu)在檢測(ce)范圍內，請重新(xin)稀釋(shi)樣品后(hou)再次測(ce)定。
方案(an)二、微孔(kong)檢(jian)測
1、試劑準備(bei)
（1）將按表(biao)2稀(xi)釋(shi)好的BSA標準品(pin)和待測蛋白樣品(pin)（原液或(huo)稀(xi)釋(shi)液）各(ge)5μl分別加到作好標記的96孔板微孔中。推薦每個樣品(pin)做2-3 個平行(xing)反(fan)應。
表(biao)2：BSA標準品配制表(biao)

2、樣品孵育及檢(jian)測(ce)
（1）每孔(kong)加入250μl Bradford蛋(dan)白定量(liang)試劑，充分混勻，蓋上96孔(kong)板蓋，室溫放置(zhi)10 分鐘(zhong)。
（2）用酶標儀測定595nm處的吸光值。
3、制作標準曲線和計(ji)算樣品(pin)濃(nong)度(du)
（1）繪制標(biao)準曲線，計算樣品(pin)中的(de)蛋白濃度。
（2）如果所得(de)到的(de)蛋白濃度不在(zai)檢測范圍內，請重新稀釋(shi)樣品后(hou)再(zai)次(ci)測定。
注意(yi)事(shi)項(xiang)
1、樣品中若含(han)有去垢(gou)劑(ji)會影響檢測(ce)(ce)結(jie)果，請試(shi)用 BCA 蛋白濃(nong)度測(ce)(ce)定試(shi)劑(ji)盒；
2、要(yao)得(de)到更為準確(que)的蛋白濃度(du)結(jie)果，每個蛋白梯度(du)和樣品均(jun)需做復孔, 每次均(jun)應(ying)做標準曲(qu)線；
3、需準備 37°C水浴或溫箱(xiang)、酶標(biao)儀或普通分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)，測定(ding)波長為 465-595nm 之間，595nm合(he)適。酶標(biao)儀需與 96孔(kong)酶標(biao)板(ban)配(pei)套使用(yong)。使用(yong)分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)測定(ding)蛋白濃度(du)時，試劑盒測定(ding)的樣品(pin)數(shu)量會因此而減少(shao)。使用(yong)溫箱(xiang)孵育時，應注意(yi)防止因水份蒸(zheng)發影響檢測結果。
4、為(wei)了您的(de)安全和健康，請穿實驗服并(bing)戴(dai)一次(ci)性手套操作。