簡(jian)要描述:Alexa Fluor 405 標(biao)記(ji)鬼筆(bi)環(huan)肽(藍色)是從一種菌類Amanita Dhalloides所提(ti)取出來的(de)環(huan)肽。它與F-actin競爭(zheng)性的(de)結(jie)(jie)合。熒光標(biao)記(ji)的(de)鬼筆(bi)環(huan)肽在納克(ke)水平就可(ke)與F-actin選(xuan)擇性的(de)結(jie)(jie)合并且易(yi)溶(rong)于(yu)水,為檢測組織切片,培養細(xi)胞和無細(xi)胞體系中(zhong)的(de)actin的(de)定(ding)位和定(ding)量提(ti)供了非(fei)常方(fang)便的(de)標(biao)記(ji)方(fang)法(fa)。
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品牌 | 其他品牌 | CAS | / |
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分子式 | / | 純度 | / |
分子量 | / | 貨號 | AC18L012 |
規格 | 300 T | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 為檢測組織切片,培養細胞等提供了非常方便的標記方法。 | 應用領域 | 生物產業 |
產品描述(shu)
鬼筆(bi)環肽是從一種菌類(lei)Amanita Dhalloides所提取出來的環(huan)肽(tai)(tai)。它與(yu)F-actin競爭性的結(jie)合。熒光(guang)標記的鬼筆環(huan)肽(tai)(tai)在納克(ke)水平就可與(yu)F-actin選擇(ze)性的結(jie)合并且易溶(rong)于水,為檢測組織(zhi)切片,培養細胞和無細胞體系中的actin的定位和定量提供了(le)非常方便的標記方法。
本產品(pin)與Sigma P5282等產品(pin)相比(bi)更具(ju)優勢、替代性,詳情(qing)見(jian)下文或咨(zi)詢銷售人(ren)員。
本產品(pin)為Alexa Fluor 405 標記鬼筆環肽(藍色),可發出高(gao)亮度、穩定的藍(lan)色熒光,染色反應(ying)特異性強,對(dui)比性高(gao),適合(he)用作F-actin的定性和定量檢測。與Actin抗(kang)體比較,Alexa Fluor405鬼(gui)筆環肽具有如下優點:(1)與(yu)actin亞單位一比一結合(he),并且不與(yu)G-actin結合(he),具(ju)有(you)比Actin抗體更好的(de)染色(se)效果。(2)且本品的結合(he)沒有物種差異性,適用性廣泛。(3)鬼筆環肽標記的(de)非(fei)特(te)異(yi)性信號(hao)可忽略,因(yin)而圖像的(de)反差較好。(4)染色與用于細胞分析的其他熒(ying)光染色*兼容(rong),包括熒(ying)光蛋(dan)白、Qdot® 納米(mi)晶體和(he)其他Alexa Fluor偶聯物(包含(han)Alexa Fluor偶聯二抗(kang))。(5)經本品結合后(hou)的F-actin仍(reng)能維(wei)持actin自身具有的許多生物(wu)學(xue)特性。
技(ji)術資料
1. Ex(nm):400
2. Em(nm):421
3. 分子量:約1400
4. 溶(rong)劑:DMSO
5. 結構式:
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規格 | 價格 |
Alexa Fluor 405 標記(ji)鬼筆(bi)環肽 (藍色) | AC18L012 | 300 T | 2280 |
保(bao)存(cun)方法
冰袋運輸,收(shou)到貨后可按需分裝(zhuang),并于-20℃避光(guang)干燥保存,避免反復凍融(rong)。1年有效。
使用(yong)方法
1. 準備1× Alexa Fluor405標(biao)記鬼筆(bi)環肽工作液(ye)
吸取1 μL 1000×Alexa Fluor405標記鬼筆(bi)環肽存儲液到1 mL含有1%BSA的(de)PBS緩沖液中即(ji)可得到1×工作液。
【注】:不同的細胞染色后情(qing)況不同,相應Alexa Fluor405鬼筆環(huan)肽使用量(liang)也需根據不同情況(kuang)而定。
2. 細胞染色步驟
(1)細胞培養過夜或(huo)更(geng)長(chang),使其(qi)密度達到(dao)50~60%匯合度。
(2)吸掉(diao)培養(yang)液(ye),37℃預熱的1×PBS(pH 7.4)清洗細胞(bao)2次(ci)。
(3)使用含有(you)3~4%甲(jia)醛(quan)的PBS溶液進行細胞固定,室溫(wen)固定10-30min。
【注(zhu)】:避(bi)免固定(ding)(ding)劑中(zhong)含有甲醇成(cheng)分,因(yin)為甲醇在固定(ding)(ding)過程中(zhong)可(ke)能破(po)壞肌動蛋白。
(4)室溫條(tiao)件下(xia),用(yong)PBS清洗固定好的(de)細(xi)胞(bao)2~3次(ci),每次(ci)10 min。
(5)(可選(xuan)):室(shi)溫(wen)條件下(xia),用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化(hua)處理3~5 min,從而增加(jia)其通(tong)透性。
【注(zhu)】:鬼筆環肽(tai)的(de)分子量小,很容易通(tong)過(guo)細胞(bao),一(yi)般情況下不需對(dui)細胞(bao)進行冷(leng)丙(bing)tong和(he)TRITON X-100處理(li)。
(6)室溫條(tiao)件下,用PBS清洗細(xi)胞2~3次,每(mei)次10 min。
(7)每(mei)孔加入 Alexa Fluor405標記鬼筆環肽工作液(ye)100 μL/孔(kong)(96孔(kong)板),室溫避光染色20~90 min,夏季時間(jian)相對短些。
(8)用(yong)PBS清洗細胞3次(ci),每次(ci)5 min,去除掉多余的Alexa Fluor405標記鬼筆環肽。
(9)(可選):加入足量的即用(yong)型(xing)DAPI溶液對細(xi)胞(bao)核進行復染,如:100 μL/孔(kong)(96孔(kong)板),室溫(wen)3~5 min。用(yong)PBS清洗細胞2次,每次5 min。
(10)于(yu)熒(ying)光顯微(wei)(wei)鏡或者共聚焦顯微(wei)(wei)鏡下進行熒(ying)光觀察,選擇Alexa Fluor405激(ji)發(fa)/發(fa)射(she)濾片(Ex/Em=400/421 nm)和(he)/或DAPI激發/發射濾片(pian)(Ex/Em=364/454 nm)。
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