Alexa Fluor 555 標記鬼筆環肽（橘色）

產品描述
　　鬼筆環肽是從一種(zhong)菌類Amanita Dhalloides所提(ti)取出來的(de)(de)環肽(tai)。它與F-actin競爭(zheng)性(xing)的(de)(de)結(jie)合(he)。熒光標(biao)記的(de)(de)鬼筆環肽(tai)在納克水平(ping)就可與F-actin選擇(ze)性(xing)的(de)(de)結(jie)合(he)并且易溶于水，為檢測組織切片，培養(yang)細胞和(he)無細胞體系(xi)中的(de)(de)actin的(de)(de)定(ding)位和(he)定(ding)量提(ti)供了(le)非常方(fang)便的(de)(de)標(biao)記方(fang)法。
　　本品為Alexa Fluor 555 標記鬼筆環肽（橘色），可發出高亮度、穩定的橘色熒光，染色反應特異性強，對比性高，適合用作F-actin的定性和定量檢測。與(yu)Actin抗體比較，Alexa Fluor 555鬼筆(bi)環(huan)肽(tai)具有如下優(you)點：(1)與(yu)actin亞單位一比一結(jie)合(he)，并且(qie)不與(yu)G-actin結(jie)合(he)，具有比Actin抗體(ti)更好的染色效果。(2)且本品的結合沒有物種(zhong)差異性(xing)，適(shi)用性(xing)廣(guang)泛。(3)鬼(gui)筆環肽標(biao)記(ji)的非特異性信號可忽略，因(yin)而圖像的反差(cha)較(jiao)好。(4)染色與用于(yu)細胞分析的其他熒光(guang)染色*兼容，包(bao)括熒光(guang)蛋白、Qdot® 納米晶體和其他Alexa Fluor偶(ou)聯(lian)物（包(bao)含Alexa Fluor偶(ou)聯(lian)二抗)。(5)經(jing)本品結合(he)后的F-actin仍能維持(chi)actin自身具有的許多生物(wu)學(xue)特性。
技術資料(liao)
1. Ex(nm)：556
2. Em(nm)：574
3. 分子(zi)量：約1300
4. 溶劑：DMSO
5. 結構式：

訂購信(xin)息

保存方法
　　冰袋運輸，收到貨后(hou)可按需分裝，并于-20℃避(bi)光(guang)干(gan)燥(zao)保存，避(bi)免(mian)反復凍(dong)融。1年有效。
使用方法(fa)
1. 準備1× Alexa Fluor 555標記鬼筆環肽工作(zuo)液
吸取(qu)1 μL 1000×Alexa Fluor 555標(biao)記(ji)鬼筆環肽存儲(chu)液到1 mL含有(you)1%BSA的PBS緩沖液(ye)中即可得到1×工(gong)作液(ye)。
【注】：不(bu)同的細(xi)胞染(ran)色后情況不(bu)同，相應(ying)Alexa Fluor555鬼筆環(huan)肽使用(yong)量也需(xu)根據不(bu)同(tong)情(qing)況而定。
2. 細胞染色步驟
（1）細(xi)胞培養過夜或更長，使其密度達到50~60%匯合度。
（2）吸掉培(pei)養液，37℃預(yu)熱的1×PBS（pH 7.4）清洗細胞2次。
（3）使用含有(you)3~4%甲(jia)醛的PBS溶液(ye)進行細(xi)胞(bao)固定(ding)，室(shi)溫固定(ding)10~30 min。
【注】：避免固定(ding)劑中含有(you)甲醇成(cheng)分，因為甲醇在固定(ding)過程中可能破壞(huai)肌動蛋白。
（4）室(shi)溫條件下(xia)，用PBS清洗(xi)固(gu)定好的(de)細胞2~3次，每(mei)次10 min。
（5）（可選）：室溫條件下，用溶(rong)于(yu)PBS的0.1% Triton X-100溶(rong)液透化處理3~5 min，從而增加其通透性。
【注】：鬼筆環肽的分(fen)子量(liang)小，很容易通(tong)過(guo)細(xi)(xi)胞，一(yi)般情況下不需對細(xi)(xi)胞進(jin)行(xing)冷(leng)丙tong和TRITON X-100處(chu)理(li)。
（6）室溫(wen)條件下，用PBS清洗細胞2~3次，每次10 min。
（7）每孔加入 Alexa Fluor 555標(biao)記鬼筆環(huan)肽(tai)工作(zuo)液100 μL/孔（96孔板），室溫避光染色20~90 min，夏(xia)季時間相對短些。
（8）用PBS清洗細胞3次，每次5 min，去除掉多余的Alexa Fluor 555標記鬼筆環肽(tai)。
（9）（可選）：加入足量的即用型DAPI溶液對細胞核進行(xing)復染(ran)，如：100 μL/孔（96孔板），室溫3~5 min。用PBS清(qing)洗細(xi)胞2次，每次5 min。
（10）于(yu)熒光(guang)顯微(wei)鏡(jing)或者共(gong)聚焦顯微(wei)鏡(jing)下進行熒光(guang)觀察，選(xuan)擇Alexa FluorTM 555激發/發射濾片（Ex/Em=556/574 nm）和/或DAPI激(ji)發/發射濾(lv)片（Ex/Em=364/454 nm）。