D-Luciferin, sodium salt  D-熒光*鈉(na)鹽（超純(chun)）

產品描述
    D-熒光*鈉鹽（超純）介紹： D-熒光(guang)素(su)（D-Luciferin）是很流行和多功能的生物發光底物。螢火蟲熒光素酶/熒光素生物發光系統存在于螢火蟲（Photinus pyralis）和其他幾種甲蟲中。熒光素酶通過二氧雜環丁酮中間體氧化ATP活化的熒光素。螢火蟲熒光素酶通過熒光素的ATP依賴性氧化產生光。來自該反應的560nm化學發光在數秒內達到峰值，當熒光素和ATP過量存在時，光輸出與熒光素酶活性成比例。螢火蟲熒光素酶長期以來與抗體結合，并在熒光素作為檢測底物的免疫測定中用作標記物。與HRP和堿性磷酸酶相比，熒光素酶對化學修飾的耐受性較差。該酶的一個特別優點是除了其高靈敏度之外，在哺乳動物組織中存在低內源熒光素酶活性。熒光素酶的另一個重要用途是衛生監測領域。熒光素酶/熒光素系統可用于檢測污染，因為存在于所有生物體中的ATP需要產生發光。這種ATP生物發光的主要應用是通過測試食品加工廠中的表面來確定質量，以確定是否存在設備或產品的污染。              

D-熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)也常(chang)用(yong)于(yu)體(ti)(ti)(ti)外研究，包(bao)括熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)酶和ATP水(shui)平分析(xi)；報告基因分析(xi)；高通量測(ce)序和各(ge)種(zhong)污染檢測(ce)。目前市場上(shang)(shang)有三(san)種(zhong)產品(pin)(pin)形式(shi)，D-熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)（游離酸），D-熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)*鈉鹽(yan)(yan)，以及D-熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)鉀鹽(yan)(yan)。這三(san)種(zhong)產品(pin)(pin)主要的(de)差別(bie)在于(yu)溶(rong)(rong)(rong)解(jie)特性(xing)(xing)上(shang)(shang)。D-熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)（游離酸）水(shui)溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)以及緩(huan)沖(chong)體(ti)(ti)(ti)系的(de)溶(rong)(rong)(rong)解(jie)性(xing)(xing)都(dou)很(hen)弱，除非溶(rong)(rong)(rong)于(yu)弱堿(jian)如NaOH和KOH溶(rong)(rong)(rong)液。溶(rong)(rong)(rong)于(yu)甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但鈉鹽(yan)(yan)和鉀鹽(yan)(yan)形式(shi)的(de)D-熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)素(su)能夠非常(chang)容易且快速(su)的(de)溶(rong)(rong)(rong)入水(shui)或者緩(huan)沖(chong)液中，使(shi)用(yong)方便(bian)，溶(rong)(rong)(rong)劑無毒性(xing)(xing)，特別(bie)適(shi)合體(ti)(ti)(ti)內實驗。配成液體(ti)(ti)(ti)后的(de)這三(san)種(zhong)產品(pin)(pin)，在絕大多(duo)數的(de)應(ying)用(yong)上(shang)(shang)都(dou)沒有實質(zhi)性(xing)(xing)的(de)差別(bie)。

訂購信息

產品性質

運輸與保存方法
冰袋運輸，-20℃保存，保質期24個月。

使用方法
1.用于(yu)體外生物發光圖像(xiang)測定(ding)的(de)實施方案(an)

1.在(zai)無菌水(shui)中制備100mM（100-200X）熒光(guang)素原(yuan)液。混合(he)均勻。立即使(shi)用(yong)，或單獨(du)使(shi)用(yong)等分試(shi)樣，并(bing)儲(chu)存在(zai)-20°C，避(bi)免凍(dong)融(rong)循環，避(bi)免暴(bao)露(lu)在(zai)光(guang)線下。

2.在預熱的(de)組織(zhi)培(pei)養基中制備(bei)0.5-1mM D-熒光(guang)素的(de)工(gong)作溶液。

3.從(cong)培(pei)養細胞(bao)中(zhong)分離培(pei)養基。

4.將熒光(guang)素工(gong)作溶液加入(ru)細(xi)胞(bao)中，并在(zai)成(cheng)像前將細(xi)胞(bao)在(zai)37°C孵育5-10分(fen)鐘。

2. 用于體內生物發光圖像測定的實施方案

1.在(zai)DPBS中(zhong)制備(bei)(bei)15mg / mL熒光素(su)儲備(bei)(bei)溶液(ye)，不(bu)含Mg2+和Ca2+。 混合均勻。

2.過濾器通(tong)過0.2μm過濾器過濾滅菌溶(rong)液。立即使用，或單獨(du)使用等(deng)分試樣，并儲存在(zai)-20°C，避(bi)免凍融(rong)循環，避(bi)免暴露(lu)在(zai)光線下。

3.在動物體重(zhong)150mg / kg（或10μL/ g熒光素(su)儲備(bei)溶液）成像*-15分鐘(zhong)腹膜內（i.p.）注射熒光素(su)。

注意：應對每種動物模型進行熒光素的動力學研究，以確定峰值信號時間。
3.熒光素報告分析分子測定的實施方案

1.在(zai)無菌水中制(zhi)備(bei)(bei)100mM熒光(guang)素儲備(bei)(bei)溶液。 立即(ji)使用，或單獨使用等分試樣(yang)，并儲存(cun)在(zai)-20°C，避免凍融循環，避免暴(bao)露在(zai)光(guang)線下(xia)。

2.制備1mM D-熒光素的(de)工(gong)作溶液，其中(zhong)含有3mM ATP，1mM DTT和15mM MgSO 4的(de)25mM tricine緩沖液，pH7.8。

3.將5-10μl細胞裂(lie)(lie)解(jie)液(ye)移入微孔板(ban)中。使用不含裂(lie)(lie)解(jie)液(ye)的裂(lie)(lie)解(jie)試劑或緩沖液(ye)作為空(kong)白。

4.根據制造商的(de)說明，使用熒光(guang)(guang)素(su)工作溶液(ye)的(de)普利光(guang)(guang)度計。

5.注入(ru)200μl熒光(guang)素工作(zuo)溶(rong)液(ye)，無延遲(chi)，10秒積(ji)分(fen)時間(jian)。

注意事項
1：D-熒(ying)光素(su)(su)鉀(jia)鹽溶于無菌水(shui)和(he)緩(huan)沖液(ye)，溶解度可高達25mg/mL。一般使(shi)用(yong)濃(nong)度為(wei)3-15 mg/mL。溶液(ye)的(de)(de)(de)pH值、溶液(ye)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)氧氣和(he)保存(cun)(cun)時(shi)間對其保存(cun)(cun)過程中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)穩定性非(fei)常重要。當溶液(ye)的(de)(de)(de)pH<6.5（發(fa)(fa)生水(shui)解作(zuo)用(yong)）或>7.5（發(fa)(fa)生消旋化(hua)作(zuo)用(yong)，D型(xing)(xing)轉化(hua)為(wei)L型(xing)(xing)）的(de)(de)(de)情(qing)況下(xia)，D-熒(ying)光素(su)(su)鉀(jia)鹽相對不穩定。如果(guo)溶液(ye)中(zhong)(zhong)存(cun)(cun)在(zai)少量的(de)(de)(de)氧氣，將加(jia)速(su)D-熒(ying)光素(su)(su)鉀(jia)的(de)(de)(de)降解速(su)度。儲(chu)(chu)備溶液(ye)可以在(zai)不含ATP的(de)(de)(de)水(shui)中(zhong)(zhong)制備，并在(zai)-20°C下(xia)避(bi)光儲(chu)(chu)存(cun)(cun)。必(bi)須(xu)用(yong)適當的(de)(de)(de)堿中(zhong)(zhong)和(he)游離酸溶解。

2：D-熒光素可與任何現有的文(wen)獻或ATP分析系統一起(qi)使(shi)用。

3：如果檢測ATP，請戴上手套(tao)并使(shi)用無(wu)ATP容器，盡(jin)量減少所(suo)有可能的ATP污染源。僅使(shi)用無(wu)菌(jun)無(wu)ATP水(shui)和(he)試劑(ji)。使(shi)用高壓滅(mie)菌(jun)水(shui)進(jin)行(xing)所(suo)有試劑(ji)制(zhi)備。