SmartCell神經酰胺高爾基體染色試劑盒Green

產品描述
　　高爾基體(ti)是大多數真核細胞胞質內(nei)(nei)囊泡(pao)和折疊膜的(de)復合體(ti)，參與(yu)分泌和細胞內(nei)(nei)運輸。它(ta)修飾內(nei)(nei)質網（ER）中內置的蛋白質和脂質，并準備將其輸出到細胞外。它還在脂質在整個細胞中的運輸和溶酶體的形成中起著重要作用。
Smart Cell NBD 神(shen)經酰胺(an)高爾基(ji)染色(se)試劑(ji)盒(he)提供了一種簡便，快速的(de)方法(fa)，可以選擇性地對(dui)活細胞或醛固定(ding)細胞中的(de)高爾基(ji)染色(se)。將 C6 NBD 神經酰胺與牛血清白蛋白（C6-NBD-Ceramide-BSA）形成復合物給予細胞。高爾基體通過形成相應的熒光代謝產物而被染色。
訂(ding)購信息

產品組分

運輸與保存
藍冰運輸。-20℃避光保存，有效期12個月。
使用方法
簡要概述
1.根(gen)據需(xu)要處理(li)細胞(bao)。
2.加入 C6 NBD 神(shen)經(jing)酰胺工(gong)作溶液，在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
3.更換染(ran)色緩沖液，在室溫或 37℃ 下(xia)孵育 15-30 min。
4.使用 FITC 濾鏡套件在顯微(wei)鏡下觀察。
5.可選：用 4％甲醛固定細胞(bao)。
溶液配制
1.儲備溶(rong)液配制
除(chu)非另有說明，否(fou)則所有未使(shi)用(yong)的儲(chu)備溶液應分為一次性使(shi)用(yong)的等分試(shi)樣，并(bing)在制備后儲(chu)存在 -20℃ 下，避免重復凍(dong)融循環(huan)。
C6 NBD 神經(jing)酰胺儲備溶(rong)液（100X）：將 100 µL的DMSO（組分 C）加入(ru)小瓶 C6 NBD 神經(jing)酰胺（組分 A）中并充分混(hun)合。【注】：將(jiang)未使用的 C6 NBD 神經酰胺原液在 -20℃ 保存，避免凍融循環。
2.工作溶液配(pei)制
C6 NBD 神經酰(xian)胺工(gong)作(zuo)液(ye)：將 10 µL的NBD 神經酰(xian)胺原液(ye)（100X）添加到(dao) 990 µL的染色緩沖液(ye)（組分 B）中，制成 NBD 神經酰(xian)胺工(gong)作(zuo)液(ye)。
可選(xuan)：將 10 µL的Hoechst 33342（組分 D）添加到 1mL的NBD 神經酰胺工作溶液中以進行核染色。
操(cao)作步驟
1. 根據需(xu)要處理細胞。
2. 直接在細胞培(pei)養基中加入 100µL的(de)C6 NBD 神經(jing)酰胺工(gong)作溶液(ye)。
3. 在室(shi)溫或 37℃ 下孵育(yu) 15-30 min。
4. 除去 C6 NBD 神(shen)經酰胺工作溶液，并用 100 µL /孔的染色緩沖(chong)液（組分(fen) B）代替(ti)。
5. 在室溫或(huo) 37℃ 下孵育 15-30 min。
6. 在裝有 FITC 濾光片的熒光顯微(wei)鏡下觀察。
7. 從步驟(zou) 4 中(zhong)除去染色(se)緩(huan)沖液(ye)，然后向每個孔中(zhong)添加(jia) 100 µL /孔/ 96 孔板的 4％ 甲醛固定緩(huan)沖液(ye)（未提供）。【注】：對于非(fei)貼壁細胞，請(qing)添加所需量（例如 2X106細胞/ mL）的 4％甲醛固定液。（可選）
8. 在室溫下(xia)將平板(ban)孵育 20-30 min，去除固定劑。用 PBS 洗滌細胞(bao) 2-3 次，然后用 100 µL /孔的染(ran)色緩沖液(ye)（組(zu)分 B）替換。（可選(xuan)）
注意事(shi)項(xiang)

1. 本產品(pin)僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨(lin)床診斷、治療等(deng)領(ling)域。

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