簡要描(miao)述(shu):0.25胰*白(bai)酶(mei)消(xiao)化液(含(han)EDTA,含(han)酚紅)含(han) 0.25%胰*白(bai)酶(mei),溶(rong)于 Hank’s 緩(huan)沖液,添加 0.9 mM EDTA,含(han)酚紅指示劑(ji),經 0.22 μm 過濾除菌。*酶(mei)在 37℃ pH 8.0 條件(jian)下(xia)消(xiao)化能力(li)*。常用*酶(mei)工作濃度為(wei) 0.25%。EDTA 可以螯合鈣(gai)鎂(mei)離子,*酶(mei)溶(rong)液中搭配 EDTA 使用可以加速細胞間連接(jie)蛋白(bai)的(de)水解,起到增(zeng)強消(xiao)化的(de)效果。酚紅是一種 pH 指示劑(ji),溶(rong)液偏堿性時呈
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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AC15L811 |
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規格 | 100 mL | 供貨周期 | 現貨 |
應用領域 | 生物產業 |
胰*白酶(Trypsin)簡稱(cheng)*酶(mei),是一種絲*酸水(shui)解酶(mei),能把多肽鏈中賴氨(an)酸和精*酸殘基中的(de)羧基端切斷。在組織細(xi)胞(bao)的(de)提取、培(pei)養,以及體外細(xi)胞(bao)培(pei)養過程中,均會使(shi)用(yong)到胰*白酶(mei)消(xiao)化(hua)液,用(yong)于水(shui)解細(xi)胞(bao)間蛋白質,使(shi)組織或細(xi)胞(bao)離散(san)成(cheng)單個細(xi)胞(bao)。
*酶在 37℃ pH 8.0 條件下消(xiao)化能力*。常(chang)用(yong)(yong)*酶工作濃度為 0.25%。EDTA 可(ke)以(yi)螯合鈣鎂離子,*酶溶液中搭(da)配 EDTA 使用(yong)(yong)可(ke)以(yi)加速細胞(bao)間連接(jie)蛋(dan)白(bai)的水解,起到(dao)增強消(xiao)化的效果。酚紅是一種 pH 指示劑,溶液偏堿性(xing)時呈紫紅色(se),偏酸性(xing)時呈橘紅色(se),近中性(xing)時呈粉紅色(se)。
本產品含(han) 0.25%胰*白(bai)酶,溶于 Hank’s 緩沖液,添加(jia) 0.9 mM EDTA,含酚紅指示(shi)劑,經 0.22 μm 過濾(lv)除菌(jun)。
訂購(gou)信息(xi)
產品(pin)名(ming)稱 | 貨號 | 規格 |
0.25%胰*白酶消化液(含EDTA,含酚(fen)紅) | AC15L811 | 100 mL |
運輸(shu)與保存
藍冰運輸。-20℃保存,有效期12個月(yue)。【注】:避免反復凍融。
使(shi)用方法
吸去細(xi)胞培養液,用無菌的(de) PBS、Hanks 液或無血清(qing)培養液洗滌細胞去除殘(can)余的血清(qing)。
加入適(shi)量(liang)本產(chan)品覆蓋細(xi)胞,室溫靜置消化 1-5 min。(不(bu)同細胞(bao)消(xiao)化時間不(bu)同)
顯微鏡(jing)下觀察,當細(xi)(xi)(xi)胞(bao)出現明顯收縮(suo),用(yong)移(yi)液槍(qiang)輕輕吹打細(xi)(xi)(xi)胞(bao)較容易(yi)將細(xi)(xi)(xi)胞(bao)吹打下來時,吸除*酶細(xi)(xi)(xi)
胞消化液,加入(ru)含(han)血清的細(xi)胞培養液,輕輕吹打下(xia)細(xi)胞,制成細(xi)胞懸(xuan)液,即(ji)可直接傳代培養。【注】:如果用移液槍(qiang)輕(qing)輕(qing)吹打時很難使細胞從板底(di)脫落(luo),表明(ming)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時間不夠,可(ke)加入(ru)*酶細胞消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)液重新消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)。切忌避免過度消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)。
注(zhu)意事項
本產(chan)品僅限于(yu)科(ke)學(xue)實驗研究使用(yong),不得用(yong)于(yu)臨床診斷、治療等領域。
由于組織(zhi)或細(xi)胞(bao)性質不(bu)同,實驗人員(yuan)應依據具體(ti)情況,確定最佳消化(hua)時(shi)間;消化(hua)細(xi)胞(bao)時(shi)間不(bu)宜過長(chang),否則會影(ying)響細(xi)胞(bao)貼壁和(he)生長(chang)狀況。
本產品不含抑菌(jun)劑,在使用過程中要特別(bie)注(zhu)意無菌(jun)操(cao)作(zuo),避免消(xiao)化液被微(wei)生物污(wu)染。
本產(chan)品不宜 4℃長期保存(cun),避(bi)免(mian)反復凍融(rong),建(jian)議(yi)分裝成(cheng)小份后-20℃保存(cun)。
對于*酶中 EDTA、酚紅的(de)(de)(de)(de)選(xuan)擇(ze)(ze)(ze),可以根據實驗需要(yao),對(dui)于(yu)一般的(de)(de)(de)(de)腫(zhong)瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao),選(xuan)擇(ze)(ze)(ze)含(han) EDTA 的(de)(de)(de)(de)*酶(mei)(mei)消(xiao)(xiao)(xiao)化液(ye)。對(dui)于(yu)較敏(min)(min)感(gan)、脆弱的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao),例如原(yuan)代細(xi)(xi)胞(bao)(bao)及很容易(yi)消(xiao)(xiao)(xiao)化的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao),選(xuan)擇(ze)(ze)(ze)不含(han) EDTA 的(de)(de)(de)(de)*酶(mei)(mei)消(xiao)(xiao)(xiao)化液(ye),如果(guo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)特(te)別敏(min)(min)感(gan),需要(yao)選(xuan)擇(ze)(ze)(ze)胰*白(bai)酶(mei)(mei)濃度更低(di)的(de)(de)(de)(de)消(xiao)(xiao)(xiao)化液(ye)。如果(guo)是需要(yao)用于(yu)流式細(xi)(xi)胞(bao)(bao)儀檢測(ce)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)凋(diao)亡(wang),則(ze)選(xuan)用不含(han) EDTA 的(de)(de)(de)(de)*酶(mei)(mei)消(xiao)(xiao)(xiao)化液(ye)。
由于 Hank’s 溶液中 NaHCO3 含量較低,不建議將本產品用于 37℃的 CO2 培養箱中消化,如果放入 CO2相,溶液會迅速變酸性。
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