簡要描述(shu):LyGreen HRM專用(yong)(yong)染料(20×in water)是(shi)一(yi)種新(xin)(xin)型的的雙鏈DNA結合(he)飽和熒光(guang)染料,是(shi)新(xin)(xin)一(yi)代用(yong)(yong)于(yu)(yu)HRM分(fen)析的熒光(guang)染料,也可(ke)用(yong)(yong)于(yu)(yu)實時定量(liang)PCR(qPCR)。
詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AN19L021/AN19L022 |
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規格 | 1ml | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 新一代用于HRM分析的熒光染料,也可用于實時定量PCR(qPCR)。 | 應用領域 | 生物產業 |
LyGreen核酸染(ran)料(liao)是(shi)一(yi)種新型的的雙鏈(lian)DNA結(jie)(jie)合飽(bao)和熒光染(ran)料(liao),是(shi)新一(yi)代用于HRM分析的熒光染(ran)料(liao),也(ye)可(ke)用于實時(shi)定量PCR(qPCR)。該(gai)染(ran)料(liao)結(jie)(jie)構上由兩個單(dan)體(ti)染(ran)料(liao)分子通(tong)過一(yi)個彈(dan)性臂連接成一(yi)個二聚體(ti),在(zai)沒有DNA存在(zai)時(shi),該(gai)結(jie)(jie)構呈無熒光環狀結(jie)(jie)構,一(yi)旦有DNA出(chu)現,則恢復(fu)隨機形態并與DNA結(jie)(jie)合發出(chu)強(qiang)烈(lie)的綠色(se)熒光。
與市場(chang)上(shang)其他熒光(guang)染料如SYBR Green I 相比,LyGreen具有如下優點:(1)靈敏(min)度高:在(zai)推薦濃度下(xia)使(shi)用(yong)時可以獲得比SYBR Green I 更強的信(xin)號(2)準確:結合雙鏈DNA,變形時染(ran)料不遷移,熒光信號準確反映雙鏈DNA變化情況。過量染料(liao)形成(cheng)二聚體,而不游離,使得LyGreen對PCR的抑制遠小于SYBR Green I,因此(ci),使用LyGreen進行的qPCR實驗(yan)可以使用快(kuai)速PCR步驟。(3)穩(wen)定性好:在(zai)正常的(de)儲存、操作和PCR過(guo)程中(zhong)不會被破壞。在(zai)緩沖溶液中(zhong)的(de)染料可以安全的(de)儲存在(zai)室溫或(huo)冰箱里,也可以反復凍融(rong)。(4)安全(quan):細胞膜穿透性測試表明,LyGreen幾乎不能(neng)穿透細胞膜。(5)兼容性:和SYBR Green I 光譜相(xiang)似,使用不(bu)同品牌qPCR儀器時(shi)不(bu)需改(gai)變光譜元件設(she)置,也無(wu)(wu)需改(gai)變操作步(bu)驟,qPCR完成后,無(wu)(wu)需加入其它核(he)酸染料便能直接在凝膠成像(xiang)系(xi)統(tong)下觀(guan)察(cha)分(fen)析。(6)重復性好(如(ru)圖1):特(te)殊(shu)設(she)計(ji)染料,相同反應體系(xi)下,熒光信號(hao)釋(shi)放僅與雙鏈濃度有關,優(you)秀(xiu)線性。
應用實例(li)
圖1. LyGreen染料用于綿(mian)羊FecB基因HRM分析.
HRM分析設備為LightCycler@480熒光(guang)定量PCR儀(德國(guo)羅氏)
訂購信息
產品名(ming)稱(cheng) | 貨(huo)號 | 規格 |
LyGreen HRM專用染料(20×in water) | AN19L021 | 1 mL |
LyGreen HRM專用染料(20×in water) | AN19L022 | 5*1 mL |
運輸與保存(cun)
藍冰運輸。-20 oC干燥避(bi)光保存,有效期12個月(yue)。
光學性質
激發波長= 497 nm
發射波長= 520 nm
使(shi)用(yong)方(fang)法
PCR反應的(de)配制(50 μL)
試劑 | 用(yong)量 |
ddH2O | 計算加水量,按終(zhong)體積50 μL |
Taq DNA poLymerase | 5 U |
2mM的 dNTP | 5 μL |
50mM MgCl2 | 2.5 μL |
20 X LyGreen | 2.5 μL |
引物(wu) | 0.1-1 μM(終濃度(du)) |
注意(yi)事項(xiang)
本產品僅限于科(ke)學實驗研究使(shi)用(yong),不得用(yong)于臨床診斷、治療等領域。
請根據不同的(de)儀器類型,不加入(ru)或加入(ru)合(he)適濃度的(de)參(can)比染料(liao)ROX。該體系(xi)需根據所使用(yong)的(de)Taq酶的(de)不同進行適當優化(hua)。
根據(ju)實驗用量于冰(bing)上向無菌離(li)心管中依(yi)次加入水,Taq poLymerase buffer, dNTPs, MgCl2, LyGreen, Taq poLymerase, and primers等配制qPCR反應體系(1×Master mix)。
將1×Master mix 適量分裝至(zhi)無菌(jun)PCR管中,并(bing)加入DNA (50 ng/反應)。
按(an)照儀器類(lei)型選(xuan)擇合適的(de)擴增程序。
做qPCR時注意設置陽性(xing)和(he)陰性(xing)對照(zhao)。
為了(le)您的安(an)全和健康,請(qing)穿實驗服并戴一次性手(shou)套(tao)操作(zuo)。
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