Alexa Fluor 488 標記鬼筆環肽（綠色）

產品描(miao)述
　　鬼筆(bi)(bi)環(huan)(huan)肽是從一種菌類(lei)Amanita Dhalloides所提取出來的(de)(de)環(huan)(huan)肽。它與F-actin競爭性(xing)的(de)(de)結合。熒光標記的(de)(de)鬼筆(bi)(bi)環(huan)(huan)肽在(zai)納(na)克水平就可與F-actin選擇性(xing)的(de)(de)結合并且易溶于水，為檢(jian)測組織(zhi)切(qie)片(pian)，培養細胞和無細胞體系中的(de)(de)actin的(de)(de)定位和定量提供了非常(chang)方(fang)便(bian)的(de)(de)標記方(fang)法。
　　本品為Alexa Fluor 488 標記鬼筆環肽（綠色），可發出高亮度、穩定的綠(lv)色熒光，染(ran)色反應特異性(xing)強，對比(bi)性(xing)高，適合用(yong)作F-actin的定性(xing)和定量檢(jian)測(ce)。與Actin抗體比(bi)較，Alexa Fluor 488鬼筆(bi)環(huan)肽具有如(ru)下優點：(1)與actin亞單(dan)位(wei)一比一結合(he)，并且不與G-actin結合(he)，具(ju)有比Actin抗體更好的染(ran)色效果。(2)且本(ben)品的結合(he)沒有物種差(cha)異性，適(shi)用性廣(guang)泛(fan)。(3)鬼(gui)筆環(huan)肽(tai)標記的非(fei)特異性信號可忽略，因(yin)而圖(tu)像的反差(cha)較好。(4)染(ran)色(se)與用于細胞分析(xi)的其(qi)(qi)他熒光染(ran)色(se)*兼容，包括熒光蛋白、Qdot® 納米晶體和其(qi)(qi)他Alexa Fluor偶聯物（包含(han)Alexa Fluor偶聯二抗)。(5)經本(ben)品結合后的F-actin仍(reng)能(neng)維持actin自(zi)身具有的許多(duo)生(sheng)物(wu)學(xue)特(te)性。
技術資料
1. Ex(nm)：493
2. Em(nm)：517
3. 分子量(liang)：1900
4. 溶劑：DMSO
5. 結(jie)構式：

訂購信息

保存方法
　　冰袋運輸(shu)，收到貨后可按需分裝，并于(yu)-20℃避(bi)光干燥保(bao)存，避(bi)免反(fan)復凍融。1年有效。
使用(yong)方(fang)法
1. 準備(bei)1× Alexa Fluor 488標(biao)記鬼筆環肽工作液
吸取1 μL 1000×Alexa Fluor 488標記(ji)鬼筆環肽存儲液到1 mL 含有1%BSA的PBS緩沖液(ye)中(zhong)即可(ke)得到1×工作(zuo)液(ye)。
【注(zhu)】：不同的細胞染色后(hou)情(qing)況不同，相應Alexa Fluor488鬼(gui)筆環(huan)肽使用量也需根(gen)據不同(tong)情況而定。
2. 細胞染色(se)步(bu)驟
（1）細胞培養過(guo)夜或更長，使其密度達到50~60%匯(hui)合度。
（2）吸掉培(pei)養液，37℃預熱的1×PBS（pH 7.4）清洗(xi)細胞2次。
（3）使(shi)用(yong)含有3-4%甲醛(quan)的PBS溶液進(jin)行細胞固(gu)定，室(shi)溫固(gu)定10~30 min。
【注】：避免(mian)固(gu)定劑(ji)中(zhong)(zhong)含有(you)甲醇成分，因(yin)為甲醇在固(gu)定過程中(zhong)(zhong)可(ke)能(neng)破壞肌(ji)動蛋白。
（4）室溫(wen)條(tiao)件(jian)下，用PBS清洗固定好的細胞2~3次，每次10 min。
（5）（可(ke)選(xuan)）：室(shi)溫條件(jian)下，用溶(rong)于(yu)PBS的0.1% Triton X-100溶(rong)液透(tou)化處(chu)理3~5 min，從而增加其通透(tou)性。
【注】：鬼筆環(huan)肽的分子量小，很容易(yi)通過細胞，一般情況下(xia)不(bu)需(xu)對細胞進行冷(leng)丙tong和TRITON X-100處理。
（6）室(shi)溫條(tiao)件下，用PBS清洗細胞(bao)2~3次，每次10 min。
（7）每孔加入(ru) Alexa Fluor 488標記鬼筆(bi)環肽工作液100 μL /孔（96孔板(ban)），室溫避光(guang)染(ran)色20~90 min，夏季(ji)時間相對(dui)短(duan)些。
（8）用(yong)PBS清洗細胞3次(ci)(ci)，每(mei)次(ci)(ci)5 min，去(qu)除(chu)掉多余的Alexa Fluor 488標記鬼筆環肽。
（9）（可選）：加入(ru)足量的即用型DAPI溶液對細(xi)胞核(he)進(jin)行復染，如：100 μL /孔(kong)（96孔(kong)板），室溫(wen)3~5 min。用(yong)PBS清洗細胞2次(ci)，每次(ci)5 min。
（10）于熒(ying)(ying)光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒(ying)(ying)光觀(guan)察，選擇Alexa FluorTM 488激(ji)發(fa)/發(fa)射濾(lv)片（Ex/Em=493/517nm）和/或DAPI激(ji)發(fa)/發(fa)射濾(lv)片（Ex/Em=364/454nm）。