凋亡檢(jian)測試劑(ji)盒 · 介(jie)紹

[產品] Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒

[貨號] AC12L033

[規格] 100T

1. 細胞凋(diao)亡簡(jian)單介紹

細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)凋亡(wang)(wang)又(you)稱(cheng)程序性(xing)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)死(si)亡(wang)(wang)，是一(yi)種(zhong)(zhong)正常的(de)生(sheng)理(li)過程，這(zhe)種(zhong)(zhong)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)死(si)亡(wang)(wang)方(fang)式與細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)壞死(si)不(bu)同(tong)，他不(bu)會(hui)引起機(ji)體的(de)炎癥反應(ying)。細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)凋亡(wang)(wang)在(zai)機(ji)體內受到高度調(diao)節，旨在(zai)犧牲特定(ding)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)為(wei)生(sheng)物(wu)體謀取更多益處，細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)凋亡(wang)(wang)廣泛存在(zai)于生(sheng)長發育和衰老(lao)的(de)各個環節中，有(you)時也作為(wei)一(yi)種(zhong)(zhong)防(fang)御機(ji)制。

細胞(bao)(bao)(bao)凋亡過(guo)程(cheng)中，細胞(bao)(bao)(bao)具有(you)典型的(de)形態學特征：第(di)1階段中（持續時間(jian)很短）細胞(bao)(bao)(bao)的(de)間(jian)接觸消失，但胞(bao)(bao)(bao)膜尚(shang)完整，粗面(mian)內質網(wang)上的(de)核(he)糖體脫落(luo)，細胞(bao)(bao)(bao)核(he)出現固縮；第(di)2階段中細胞(bao)(bao)(bao)核(he)碎裂后與細胞(bao)(bao)(bao)內的(de)各種細胞(bao)(bao)(bao)器(qi)結(jie)合(he)，并(bing)進一步被質膜包(bao)裹形成凋亡小體；第(di)3階段中吞噬細胞(bao)(bao)(bao)吞噬凋亡小體，將(jiang)其消化并(bing)重新(xin)供機體使用。

2. 細(xi)胞凋亡(wang)信號通(tong)路

細(xi)胞凋亡(wang)的途(tu)徑(jing)主要(yao)有兩(liang)種且相(xiang)互關(guan)聯(lian)(lian)，外(wai)源(yuan)(yuan)性或死亡(wang)受體(ti)途(tu)徑(jing)、內在(zai)性或線(xian)粒(li)體(ti)途(tu)徑(jing)。外(wai)源(yuan)(yuan)性途(tu)徑(jing)涉及跨膜受體(ti)介導的相(xiang)互作用，當細(xi)胞表面的死亡(wang)受體(ti)（FAS受體(ti)）被激(ji)活，啟動(dong)半胱天冬酶（Caspase）級聯(lian)(lian)反應，該反應能導致(zhi)細(xi)胞死亡(wang)；而內在(zai)途(tu)徑(jing)直接在(zai)細(xi)胞內啟動(dong)，由(you)線(xian)粒(li)體(ti)釋(shi)放促凋亡(wang)蛋白（SMAC和(he)細(xi)胞色素C），從而激(ji)活半胱天冬酶，導致(zhi)細(xi)胞凋亡(wang)。

3. 細胞凋亡如何檢測（基于生(sheng)物學功(gong)能、生(sheng)化標記方法(fa)）

（1）Annexin V-FITC/PI檢測法

磷脂(zhi)酰絲氨酸（Phosphatidylserine，PS）為(wei)帶負電荷的(de)磷脂(zhi)，位(wei)于(yu)正常活細胞(bao)(bao)細胞(bao)(bao)膜(mo)脂(zhi)質(zhi)雙層的(de)內側(ce)，細胞(bao)(bao)凋亡(wang)早期 PS 發(fa)生(sheng)外(wai)(wai)翻，暴露于(yu)細胞(bao)(bao)膜(mo)外(wai)(wai)側(ce)。Annexin V(AV)是一種分子量約為(wei)36 kDa 的(de)Ca2+依(yi)賴性磷脂(zhi)結合蛋白，與PS有高(gao)度親和力，因此(ci)利用FITC標記的(de)AV蛋白可以結合細胞(bao)(bao)膜(mo)外(wai)(wai)側(ce)的(de)PS，用于(yu)指示早期凋亡(wang)細胞(bao)(bao)。

碘化丙(bing)啶（Propidium Iodide，PI）是一種核(he)酸染料，PI 無法通過正常(chang)的(de)細胞(bao)膜或(huo)早期凋亡(wang)的(de)細胞(bao)膜, 但可(ke)以(yi)透過凋亡(wang)中(zhong)晚期細胞(bao)或(huo)者(zhe)壞(huai)死細胞(bao)的(de)細胞(bao)膜并對細胞(bao)核(he)進行染色(se)，用(yong)以(yi)區分存(cun)活的(de)早期凋亡(wang)細胞(bao)、晚期凋亡(wang)細胞(bao)以(yi)及(ji)壞(huai)死細胞(bao)。

因此FITC-Annexin V 與PI 雙染(ran)方法可(ke)以將處于不同凋亡時期的(de)細胞區分開。

（2）JC-1 線粒體膜電位檢測

線粒(li)體(ti)膜(mo)電(dian)(dian)(dian)位降低(di)是(shi)細胞早(zao)期(qi)凋亡的(de)一個(ge)標志，當線粒(li)體(ti)膜(mo)通(tong)透性發生(sheng)改(gai)變時，膜(mo)電(dian)(dian)(dian)位會(hui)降低(di)。JC-1 是(shi)一種廣泛用于檢測線粒(li)體(ti)膜(mo)電(dian)(dian)(dian)位△ Ψm 的(de)理想熒(ying)(ying)光(guang)探針，在(zai)線粒(li)體(ti)膜(mo)電(dian)(dian)(dian)位較(jiao)高時，產生(sheng)紅色熒(ying)(ying)光(guang)；在(zai)線粒(li)體(ti)膜(mo)電(dian)(dian)(dian)位較(jiao)低(di)時，產生(sheng)綠(lv)色熒(ying)(ying)光(guang)。

（3）TUNEL檢(jian)測法

細(xi)胞(bao)凋亡的(de)一個顯著特點是細(xi)胞(bao)染(ran)色體(ti) DNA 的(de)降(jiang)(jiang)解(jie)，這種降(jiang)(jiang)解(jie)非常特異并有規(gui)律，所(suo)產生的(de)不同(tong)長度的(de) DNA 片段約為(wei) 180 bp-200 bp 的(de)整數(shu)倍，表現為(wei)瓊(qiong)脂糖凝膠電泳中(zhong)呈現特異的(de)梯狀 Ladder 圖(tu)譜。

TUNEL 法可(ke)以(yi)選擇(ze)性(xing)的(de)對凋亡細胞直(zhi)接(jie)進行原(yuan)位檢(jian)(jian)測， 而非壞(huai)死細胞或因輻照和藥物治療(liao)而造成的(de) DNA 鏈斷裂的(de)細胞，是一(yi)種更快速(su)、直(zhi)接(jie)的(de)檢(jian)(jian)測手(shou)段。

（4）凋亡(wang)相(xiang)關分子(zi)檢測(ce)法(fa)

在半胱天冬酶家族中(zhong)，Caspase-1、3、7和8主要參(can)與細胞凋亡過程。測量(liang)活細胞中(zhong)的(de) Caspase 1 活化能(neng)夠檢測細胞凋亡。Caspase-3 具有特異(yi)性的(de)底(di)物多肽識(shi)別序列，通過 Caspase 3 作用，斷裂 Rh 110 多肽，產(chan)生具有強(qiang)烈綠(lv)色熒光的(de) Rh 110。Caspase-8由CASP8基(ji)因所編碼，已(yi)被證(zheng)明(ming)具有底(di)物選擇性，通過 Caspas-8 的(de)切割 R110 肽產(chan)生強(qiang)綠(lv)色熒光。

（5）DNA染色檢測法

Hoechst 33258 和(he)Hoechst 33342是(shi)(shi)一(yi)種低細(xi)(xi)胞(bao)(bao)毒性的(de)(de)(de)穿透細(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜(mo)的(de)(de)(de)藍色(se)熒(ying)(ying)光(guang)染(ran)(ran)料。Hoechst 33258 為特異性 DNA 染(ran)(ran)料，與 A-T 鍵結合，這種染(ran)(ran)料對死(si)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)或經70%冷(leng)乙(yi)醇固定(ding)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)可(ke)立即染(ran)(ran)色(se)，而活細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)著(zhu)色(se)是(shi)(shi)漸進(jin)性的(de)(de)(de)，在 10 min 內可(ke)達(da)飽和(he)。在熒(ying)(ying)光(guang)顯微鏡(jing)下，活細(xi)(xi)胞(bao)(bao)核呈彌散均(jun)勻(yun)熒(ying)(ying)光(guang)，出(chu)現細(xi)(xi)胞(bao)(bao)凋亡時，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)核或細(xi)(xi)胞(bao)(bao)質(zhi)內可(ke)見濃(nong)染(ran)(ran)致密(mi)的(de)(de)(de)顆粒塊(kuai)狀(zhuang)熒(ying)(ying)光(guang)。

超級雙(shuang)十二 · 活動

一(yi) · 0元享雙份試用

轉發本文至朋友圈，集贊12個，可以領取一份10T-凋亡(wang)檢測(ce)試劑盒(he)；集贊12+12個（總(zong)計≥24個），可以再領取一份100T-CCK8。（共400份，每個課題組僅限1份，活動期止或送完為止）

二 · 活(huo)動產品，買(mai)滿就(jiu)送樂(le)影(ying)卡！

活動期間單次采購 細胞(bao)凋(diao)亡檢測試劑盒 或 CCK-8 滿 1212元（兩種產品可組合購買），贈送一張 100元淘票(piao)票(piao)樂影卡 。

三 · 送樂影卡！

點擊下方小程序即可參與活動，共10個(ge)得獎名額，獎品是每人 一張100元淘(tao)票(piao)票(piao)樂影(ying)卡 。

開(kai)始時間：2023年12月20日13：00，得獎者會收到微信提醒

領取方式：3個工作日內聯系相關業務員進行兌換，逾期視為自動放棄

注意事項：

1.關注微信公眾號后回復“凋(diao)亡檢測"參與活動；

2.樂(le)影卡(ka)有效(xiao)期(qi)3年，綁定后長期(qi)有效(xiao)。

超級(ji)雙十(shi)二 · 活動規則(ze)

活(huo)動時間：即日起-2024年1月12日

活動范圍：全國生物相關終端客戶

試用裝領取方(fang)式(shi)：請聯系各區域代理商、業務員，確認后會盡快送達。

注意事(shi)項(xiang)：

1.關注微信公眾號后參與(yu)活動；

2.活動最終(zhong)解(jie)釋(shi)權歸和元李記所有。